Kong Weisong 1,2, Tang Dangyu2,3,
Zeng Xiaoying 2,3, Zhe Wei 2,3, Shi Honglin 2, Zhang
Junsong 1 Keywords rapid high performance liquid chromatography; phenols; main stream smoke; high-speed homogenization 匀浆法提取-快速液相色谱法测定卷烟主流烟气中苯酚 孔维松 1,2;汤丹俞1,3;曾晓鹰1,3;者 为1,3;施红林 1;张峻松2(1云南省烟草化学重点实验室,云南烟草科学研究院,昆明 650106;2 郑州轻工业学院,郑州 550002; 3红云红河集团技术中心,昆明:650202) 摘要 研究了用匀浆法提取,快速液相色谱法测定卷烟主流烟气中苯酚的方法,卷烟主流烟气样品用剑桥滤片捕集,以 1%的醋酸匀浆法提取滤片上捕集的苯酚;然后采用ZORBAX Stable Bound (2.1´ 50 mm, 1.8 mm) 快速分离柱,乙腈和0.5%的醋酸为流动相分离,用荧光检测器检测,激发波长为272 nm,发射波长为309 nm。方法日内相对标准偏差为2.4%,日间相对标准偏差为3.5%;加标回收率为97.2%-104.5%,结果令人满意。关键词 苯酚,快速液相色谱,主流烟气,匀浆提取
卷烟烟气中酚类物质含量的多少直接影响着卷烟的抽吸品质,某些酚类物质还可能影响卷烟的口感,引起涩味、辣味和余味不干净等[1,2]。特别是最近我国国家烟草专卖局将以CO、HCN、NNK、NH3、 B[a]P、苯酚和巴豆醛等7种成分作为卷烟安全性评价指标,卷烟主流烟气中苯酚的测定进一步引起了人们的关注。目前苯酚的测定主要有分光光度法、气相色谱法和液相色谱法等
[3-10]。用分光光度法只能近似测定酚的总量,用气相色谱法直接测定时苯酚易拖尾,峰面积重现性差;因此高效液相色谱法成为了测定苯酚最常用的方法,用液相色谱分离检测酚类化合物已有大量文献报道。但大多采用剑桥滤片捕集,1%的醋酸超声浸取,高效液相色谱-荧光检测器测定苯酚的方法[3-10]。超声法虽然是一种新型的提取技术,但就目前而言提取时间长、能耗高,噪声大,环境欠友好。 1. 实验部分 1.1. 仪器与试剂 HP 1100高效液相色谱仪(美国安捷伦公司);包括 HP 1100 四元泵,HP 1100 自动进样器,HP 1100柱温箱,HP 1100荧光检测器,Chemical Station 色谱工作站。 RM200型20孔道自动吸烟机 (Borgwaldt,德国);T10型高速匀浆机 (德国IKA 公司);乙腈:高效液相色谱专用(美国Fisher公司生产);冰醋酸:分析纯试剂;无酚蒸馏水:每升蒸馏水中加入1.0 g硫酸铜,用石英亚沸蒸馏器重蒸;苯酚标样(含量≥ 99%;瑞士Fluka公司生产),用乙腈配成1.0 mg/mL的储备液,使用时用乙腈稀释成所需浓度的标准工作液。 1.2. 样品处理 卷烟样品每样取1条,在GB/T 16447规定的条件下进行平衡,挑选平均重量± 0.02 g和平均吸阻± 49 Pa的卷烟,在YC/T 29规定的条件下用吸烟机进行抽吸,每次测定选4支烟抽吸,用44 mm的玻璃纤维剑桥滤片捕集卷烟主流烟气。卷烟抽吸完后把剑桥滤片剪碎,放入100 mL的锥形瓶中,加入50 mL 1%的醋酸溶液,置于高速匀浆机中20000转匀浆萃取1.0 min。取2.0 mL的提取液用0.45 m m的针头过滤器过滤,供液相色谱分析用。 1.3. 色谱条件 色谱柱为ZORBAX Stable Bound (2.1´ 50 mm, 1.8 mm)快速分离柱;流动相为 乙腈(内含1%的醋酸)和1%的醋酸溶液梯度洗脱;流速为1.0 mL/min;梯度变化为:A乙腈(内含1%的醋酸),B 1%的醋酸,按:0 min (A 0% + B 100%),2.0 min (A 40 % + B 60%),3.0 min (A 0% + B 100%),每样品分析时间为5.0 min。用荧光检测器检测,激发波长为272 nm,发射波长为310 nm。进样体积为5.0 L 在该条件下标样和烟气样品的色谱图见图-1。 2. 结果与讨论 2.1 样品前处理 分别用匀浆法、振荡浸取法和超声波浸取法对相同的样品进行提取比较,结果见表-1,由表-1数据可知,高速匀浆法提取所需时间明显少于其它两种提取方法,所以本实验采用高速匀浆法提取,提取时间为1.0 min与1.5 min回收率差别不大,从提高效率的角度考虑,本实验选择提取时间为0.5 min,匀浆机转速未20000 转/min。 表1 不同处理方法的回收率
2.2 分离条件的选择
2.5 日内精密度实验 卷烟样品在相同条件下平行测定7次 (同批次处理),并计算7次平行测定结果的相对标准偏差,可得苯酚的RSD为2.4%;说明方法精密度良好。 2.6 日间精密度实验 卷烟样品在不同时间内测定(每天测定1次,共7次),计算7次测定结果的相对标准偏差,可得苯酚的RSD为3.5%;说明在不同时间内测定,方法精密度仍然良好。 2.7 回收率实验 样品按选定的样品前处理条件处理,并按选定色谱条件进样分析,测定时捕集相同的烟气样品2份,其中一份为基准,另一份加入已知量的苯酚 (设 0.05 mg、0.1 mg、0.2 mg三个添加量),在相同条件下测定3次,通过加入标准的测出量除以标准加入量计算回收率。得苯酚的回收率在97.2-104.5%之间说明方法回收率很高。 2.8 与其它测定方法的比较 按1.2所述的方法和中国烟草行业标准 [10] 分别对同一品牌不同批次卷烟样品主流烟气中的苯酚进行测定,测定数据列于表-2中。从表中可以看出,对于相同的卷烟样品,按照本文优化的方法检测出的苯酚含量和烟草行业标准相符合。 表2 不同方法测定的苯酚含量(单位:mg·cig-1)
2.9 卷烟样品测定按照1.2所述的方法对国内7个不同品牌卷烟主流烟气中的苯酚进行测定,卷烟类型、对应的焦油量和测定结果列于表-3中。从表中可以看出,卷烟主流烟气中苯酚释放量与卷烟的焦油量有关,焦油量高的卷烟一般情况下主流烟气中苯酚释放量也相应的高,低焦油卷烟苯酚含量较低(如7#卷烟)。 表3 卷烟样品主流烟气中苯酚含量的测定结果 (单位:mg·cig-1)
3 结论研究了用匀浆法提取,高效液相色谱-荧光检测法测定卷烟主流烟气中苯酚(国家烟草专卖局确定的7种有害成分之一)的方法,高速匀浆法提取具有提取完全、效率高、能耗低等特点,所需时间明显少于振荡浸取法和超声波浸取法。本方法还采用安捷仑ZORBAX Stable Bound (2.1´ 50 mm, 1.8 mm) 快速分离色谱柱,可5.0 min分析一个样品;和常规液相色谱分析相比,分析时间缩短80%以上,大大节约了分析时间,节约了流动相消耗,提高了工作效率。 参考文献 [2] Hoffmann D. Bei Zur Tab Int, 1998 , 23(1): 49-52 [3] 孟冬玲.烟草和烟气中酚类物质的分析方法研究及应用.昆明理工大学,硕士学位论文.2004. [4] Smith C J, Hansch,C. Food and Chemical Toxicology, 2000,38(7): 637-646 [5] Hager B, Niessner R. Aerosol Science and Technology. 1997, 26(2): 163-174 [6] Hu Y L, Zheng Y X, Li G K. Analytical Sciences. 2004, 20(4): 667-671. [7] 王岚,李忠,杨光宇等. 烟草科学研究. 2003.4:116-118. [8]黄云,樊瑛,缪明明等. 分析试验室.2007.26(8):10-13. [9] 刘芳,杨柳,倪朝敏,任卓英,缪明明,丁中涛. 烟草科技, 2007,22(10):31-35. [10] 谢复炜,王昇,吴鸣,夏巧玲. 中国烟草行业标准(YC/T 255-2008) 卷烟 主流烟气中主要酚类化合物的测定 高效液相色谱法 . 北京:国家标准出版社,2008-4-14. [11] 陈子雷,张 红,王文博,丁蕊艳,杜红霞,杨国生. 中国卫生检验杂志. 2006,16(12):1228-1231. [12] Biradar. S. V, Patil. A. R, Sudarsan. G. V, Pokharkar. V. B. Powder Technology, 2006, 169(1): 22-32. |